Elektroforees: mis see on, milleks see on mõeldud ja kuidas seda tehakse

Sisu

• Milleks see on mõeldud
• Kuidas seda tehakse
• Elektroforeesi tüübid
• 1. Hemoglobiini elektroforees
• 2. Valkude elektroforees

Elektroforees on laboritehnika, mille eesmärk on eraldada molekulid vastavalt nende suurusele ja elektrilaengule, et oleks võimalik diagnoosida haigusi, kontrollida valgu ekspressiooni või tuvastada mikroorganisme.

Elektroforees on lihtne ja odav protseduur, mida kasutatakse laboriprotseduurides ja uurimisprojektides. Elektroforeesi eesmärgi kohaselt võib näiteks diagnoosi saamiseks olla vajalik teha muid katseid ja eksameid.

Milleks see on mõeldud

Elektroforeesi saab läbi viia erinevatel eesmärkidel nii uurimisprojektides kui ka diagnoosimisel, kuna see on lihtne ja odav tehnika.Seega saab elektroforeesi teha:

• Tuvastage viirused, seened, bakterid ja parasiidid, kusjuures see rakendus on uurimisprojektides tavalisem;
• Isaduse katse;
• Kontrollige valkude ekspressiooni;
• Tuvastada mutatsioonid, mis on kasulikud näiteks leukeemia diagnoosimisel;
• Analüüsige ringleva hemoglobiini tüüpe, olles kasulik sirprakulise aneemia diagnoosimisel;
• Hinnake veres leiduvate valkude hulka.

Elektroforeesi eesmärgi kohaselt võib diagnoosi lõpuleviimiseks olla vajalik arsti jaoks muude täiendavate testide läbiviimine.

Kuidas seda tehakse

Elektroforeesi läbiviimiseks on vaja geeli, mis võib olla UV aku või LED-valgustusseade, tuntud ka kui transilluminaator, sõltuvalt otstarbest polüakrüülamiid või agaroos, elektroforeesi puhver ja vaat, molekulmassimarker ja fluorestseeruv värv.

Pärast geeli ettevalmistamist tuleb asetada konkreetne ese nii, et süvendid oleksid tehtud geelis, mida rahvasuus nimetatakse kammiks, ja lasta geelil taheneda. Kui geel on valmis, kandke ained lihtsalt aukudesse. Selleks tuleb ühte süvendisse panna molekulmassimarker, positiivne kontroll, mis on aine, mis on teada, negatiivne kontroll, mis tagab reaktsiooni kehtivuse, ja analüüsitavad proovid. Kõik proovid tuleb segada fluorestseeruva värvainega, sest nii on võimalik transillinaatoril olevaid ribasid visualiseerida.

Proovidega geel tuleb asetada elektroforeesivaati, mis sisaldab spetsiifilist puhverlahust, ja seejärel lülitatakse seade sisse nii, et tekiks elektrivool ja sellest tulenevalt potentsiaalne erinevus, mis on oluline eraldusosakeste jaoks vastavalt nende koormus ja suurus. Elektroforeetiline tööaeg varieerub vastavalt protseduuri eesmärgile ja võib kesta kuni 1 tund.

Määratud aja möödudes on võimalik vaadata elektroforeesi tulemust läbi transilluminaatori. Kui geel asetatakse UV- või LED-valguse alla, on vöötmustrit võimalik visualiseerida: mida suurem on molekul, seda väiksem on selle migratsioon, lähenedes kaevule, samas kui molekul on kergem, seda suurem on rändepotentsiaal.

Reaktsiooni valideerimiseks tuleb positiivse kontrolli ribad visualiseerida ja negatiivses kontrollis ei tohi midagi visualiseerida, kuna vastasel juhul näitab see saastumist ja kogu protsessi tuleb korrata.

Elektroforeesi tüübid

Elektroforeesi saab läbi viia erinevatel eesmärkidel ja vastavalt selle otstarbele võib kasutada mitut tüüpi geeli, kõige tavalisemad on polüakrüülamiid ja agaroos.

Elektroforeesi mikroorganismide tuvastamiseks tehakse sagedamini uurimislaborites, kuid diagnostilistel eesmärkidel saab elektroforeesi kasutada hematoloogiliste haiguste ja valkude hulga suurenemisega arenevate haiguste tuvastamiseks, mis on peamised elektroforeesi tüübid:

1. Hemoglobiini elektroforees

Hemoglobiini elektroforees on laboris tehnika, mis viiakse läbi veres ringlevate erinevat tüüpi hemoglobiini tuvastamiseks, mis võimaldab tuvastada hemoglobiini sünteesiga seotud haigusi. Hemoglobiini tüüp määratakse kindlaks elektroforeesi abil spetsiifilisel pH-tasemel, ideaaljuhul vahemikus 8,0–9,0, ribade mustriga, mida saab võrrelda normaalse mustriga, võimaldades tuvastada ebanormaalseid hemoglobiine.

Milleks see on tehtud: Hemoglobiini elektroforees viiakse läbi hemoglobiini sünteesiga seotud haiguste, nagu sirprakuline aneemia ja hemoglobiin C haigus, uurimiseks ja diagnoosimiseks, lisaks sellele, et see on kasulik ka talasseemia eristamisel. Siit saate teada, kuidas tõlgendada hemoglobiini elektroforeesi.

2. Valkude elektroforees

Valkude elektroforees on uuring, mida arst soovib veres ringlevate valkude hulga hindamiseks ja seeläbi haiguste tuvastamiseks. See uuring viiakse läbi vereproovist, mida tsentrifuugitakse plasma saamiseks - vere osa, mis koosneb teiste ainete hulgas valkudest.

Pärast elektroforeesi saab visualiseerida ribade mustri ja seejärel graafiku, milles on näidatud iga valgufraktsiooni kogus, mis on diagnoosi jaoks põhiline.

Milleks see on tehtud: Valgu elektroforees võimaldab arstil uurida hulgimüeloomi, dehüdratsiooni, tsirroosi, põletiku, maksahaiguse, pankreatiidi, luupuse ja hüpertensiooni esinemist vastavalt bändimusterile ja uuringuaruandes esitatud graafikule.

Saage aru, kuidas seda tehakse ja kuidas mõista valgu elektroforeesi tulemust.